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    制備液相保護柱的制備步驟和注意事項

    更新時間:2024-10-23  |  點擊率:583
      制備液相保護柱是一個涉及多個步驟的精細過程,其主要目的是保護色譜柱,延長其使用壽命,并確保分析結果的準確性和可靠性。以下是制備液相保護柱的一般步驟和注意事項:
     
      一、制備步驟
     
      1.材料選擇與準備
     
      填料選擇:保護柱的填料應與色譜柱的填料相匹配,以確保相似的分離性能和兼容性。常見的填料包括硅膠、氧化鋁、C18等。
     
      篩板準備:保護柱柱芯的兩端各有一個篩板,用于過濾流動相和樣品中的微粒污染物。篩板的孔徑應小于色譜柱篩板的孔徑。
     
      2.柱體組裝
     
      將選定的填料裝入柱體中,確保填料均勻且緊密。
     
      在柱體的兩端安裝篩板,并固定好。
     
      3.預洗與平衡
     
      使用與后續實驗相同的流動相對保護柱進行預洗,以去除柱子中的殘留物并穩定柱子的性能。
     
      確保流動相在保護柱內達到吸附平衡,以提高分離效果。
     
      4.連接與測試
     
      將制備好的保護柱連接到色譜系統中,通常位于色譜柱之前。
     
      進行系統測試,檢查保護柱的密封性、流速和分離效果等。
     
      二、注意事項
     
      1.填料選擇與色譜柱匹配
     
      保護柱的填料應與色譜柱的填料相同或相似,以確保相似的分離性能和兼容性。
     
      2.篩板孔徑選擇
     
      篩板的孔徑應小于色譜柱篩板的孔徑,以有效攔截可能堵塞色譜柱篩板的顆粒。
     
      3.流速控制
     
      避免超過保護柱的最大流速,以防止損壞柱子的填充材料并影響其壽命和分離效果。
     
      4.pH范圍控制
     
      使用符合保護柱pH范圍的溶劑和緩沖液,以避免破壞柱子的填充材料。
     
      5.樣品前處理
     
      在樣品進入保護柱之前進行前處理,如過濾、離心等,以去除樣品中的雜質和顆粒。
     
      6.定期維護與更換
     
      定期對保護柱進行物理清洗、沖洗以及檢查密封件等維護工作。
     
      當保護柱的分離效果明顯下降時,應及時更換新的保護柱。
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